超值精品推薦：Cdc42 Pulldown Activation Assay Kit（高分文獻(xiàn)來幫忙）

          武漢紐斯特生物技術(shù)有限公司的Cdc42活性檢測試劑盒主要是利用識別蛋白特異形態(tài)的Cdc42-GTP單克隆抗體特異性的去檢測細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行GTPγS活化處理）活性Cdc42-GTP的水平。簡言之，特異性識別Cdc42活化構(gòu)象的鼠單克隆抗體可以特異性結(jié)合細(xì)胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白，然后利用Protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來，再利用識別Cdc42 兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測。
                                                       
               與傳統(tǒng)的 GST- pulldown 方法相比，該試劑盒具有以下明顯優(yōu)勢

1. 靈敏度高；誘導(dǎo)蛋白與目標(biāo)蛋白中的結(jié)合對蛋白量的要求比較高。而抗體與蛋白的結(jié)合對樣本中蛋白的要求比較少。
2. 特異性強(qiáng)；因?yàn)檎T餌蛋白是需要加上GST標(biāo)簽的重組蛋白，所以是非生理狀態(tài)下的驗(yàn)證，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和形式可能與天然狀態(tài)下存在一定差異，而抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合，活細(xì)胞狀態(tài)下蛋白質(zhì)之間的相互作用被保持，所以其反映的是細(xì)胞中真實(shí)的蛋白情況.
3. 應(yīng)用更為廣泛；試劑盒中能夠特異性識別GTP結(jié)合狀態(tài)的三聚體G蛋白或者小G蛋白的單克隆抗體，適應(yīng)各種種屬（Human，Mouse，Rat，Rice plants，Pig Cotton，bacteria，Escherichia coli等）應(yīng)用范圍非常廣泛（ IP ,WB ,IHC IF ICF,ICC,IHF.FC,Elisa 等）隨著這些應(yīng)用的普及，G 蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展，必將進(jìn)一步加快。

  高分文獻(xiàn)解析

       纖維化可以在大多數(shù)器官中發(fā)展并引起器官衰竭。肺纖維化的最常見類型稱為特發(fā)性肺纖維化，其中纖維化始于肺周圍，然后向肺中心發(fā)展，最終導(dǎo)致呼吸衰竭。關(guān)于該疾病的發(fā)病機(jī)理和外周至中心進(jìn)展的機(jī)制知之甚少。
      2019年12月19日，南京醫(yī)科大學(xué)附屬無錫人民醫(yī)院陳靜瑜及NIBS湯楠共同通訊在Cell 在線發(fā)表題為“Progressive Pulmonary Fibrosis Is Caused by Elevated Mechanical Tension on Alveolar Stem Cells”的研究論文，該研究發(fā)現(xiàn)肺泡干細(xì)胞（AT2細(xì)胞）中Cdc42功能的喪失會導(dǎo)致周圍到中心的進(jìn)行性肺纖維化。
      進(jìn)一步表明，在肺切除術(shù)后和未治療的老年小鼠中，Cdc42-null AT2細(xì)胞不能再生新的肺泡，從而導(dǎo)致AT2細(xì)胞持續(xù)暴露于升高的機(jī)械張力。同時，該研究證明升高的機(jī)械張力會激活A(yù)T2細(xì)胞中的TGF-β信號轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)，從而驅(qū)動肺纖維化的外周向中心發(fā)展?？偠灾撗芯吭谑軗p的肺泡再生，機(jī)械張力和進(jìn)行性肺纖維化之間建立了直接的聯(lián)系。
      纖維化可以在大多數(shù)器官中發(fā)展并引起器官衰竭。肺纖維化的最常見類型稱為特發(fā)性肺纖維化，其中纖維化始于肺周圍，然后向肺中心發(fā)展，最終導(dǎo)致呼吸衰竭。關(guān)于該疾病的發(fā)病機(jī)理和外周至中心進(jìn)展的機(jī)制知之甚少。

該研究發(fā)現(xiàn)肺泡干細(xì)胞（AT2細(xì)胞）中Cdc42功能的喪失會導(dǎo)致周圍到中心的進(jìn)行性肺纖維化。進(jìn)一步表明，在肺切除術(shù)后和未治療的老年小鼠中，Cdc42-null AT2細(xì)胞不能再生新的肺泡，從而導(dǎo)致AT2細(xì)胞持續(xù)暴露于升高的機(jī)械張力。同時，該研究證明升高的機(jī)械張力會激活A(yù)T2細(xì)胞中的TGF-β信號轉(zhuǎn)導(dǎo)環(huán)，從而驅(qū)動肺纖維化的外周向中心發(fā)展?？偠灾?，該研究在受損的肺泡再生，機(jī)械張力和進(jìn)行性肺纖維化之間建立了直接的聯(lián)系。

2.文獻(xiàn)中使用試劑盒中的組份：Anti-active Cdc42 Mouse Monoclonal antibody (Cat#26905) 用于免疫熒光染色（IF)

Mouse AT2 cells were cultured on either non-stretched or stretched silicon membranes (Figure 1A). By day 3, the shape of AT2 cells cultured on stretched silicon membranes changed significantly compared with the round shape of AT2 cells cultured on non-stretched silicon membranes (Figure 1B). By performing immunostaining using an antibody that can specifically recognize guanosine triphosphate (GTP)-CDC42, we found that the expression levels of GTP-CDC42 were significantly increased in stretched AT2 cells (Figures 1B and 1C). In addition,the levels of GTP-CDC42 increased significantly in the lysates of  lungs on post-lung lobe resection (PNX) days 5 and 7 (Figure 1D).Given our previous observation that differentiation of AT2 cells occurs after post-PNX day 5 (Liu et al., 2016), we hypothesized that activation of Cdc42 may be required for differentiation of AT2 cells to AT1 cells. 

3.超值性價比: Cdc42 Pulldown Activation Assay Kit (IP-WB) 完全可以替代文章中，

用于Cdc42-GTP 激活水平的分析

 Web:haodinet.com            Tel:18062798497   

Cdc42 Pulldown Activation Assay Kit       文章首席專家專訪         全文下載